无糖1640培养基

　　细胞培养基的种类很多，按其来源分为合成培养基和天然培养基(目前使用的培养基绝大部分是合成培养基)，按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌，液体培养基由专业商家提供，用户可直接使用，非常方便。

　　碳水化合物：

　　碳水化合物是细胞生长主要能量来源，其中有的是合成蛋白质和核的成分。

　　无机盐：

　　培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外，通过提供钠，钾和钙离子，帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg～320mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意：向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压，特别是溶于强或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。

　　缓冲系统：

　　大多数细胞所需pH在7.2-7.4。但是，细胞培养zui适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH(7.4-7.7),而传代转化细胞系则需要偏pH(7.0-7.4)。

　　由于多数培养液靠碳氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲，因此，气相中的CO2浓度应与培养液中氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5%，培养液中NaHCO3的加入量为1.97g/L;如果CO2浓度维持在10%，培养液中NaHCO3的加入量为3.95g/L。

　　细胞培养瓶盖不应拧得太紧，以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液，在pH7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力，但是非常昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳钠(0.34g/L)共用，以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。

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